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SK-BR-3人乳腺腺癌傳代方法
點(diǎn)擊次數(shù):1435 更新時(shí)間:2021-05-21

  細(xì)胞信息表

 

細(xì)胞名稱          SK-BR-3人乳腺腺癌 

 種屬              

 組織來(lái)源          乳腺腺癌

 生長(zhǎng)狀態(tài)          貼壁生長(zhǎng)

 形態(tài)特征          上皮細(xì)胞樣

 培養(yǎng)條件          培養(yǎng)基類型:RPMI-1640

 FBS:10%

抗生素:雙抗

培養(yǎng)條件:37℃,CO2:5%

 

傳代方法收到細(xì)胞后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài):如果沒(méi)長(zhǎng)滿,將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(約80%-90%)則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法:

         1棄去培養(yǎng)基,用不含鈣、鎂離子的PBS1-2次。

         21ml0.25%的胰酶(含0.02%EDTA),讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi),隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化,待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

         3一般沒(méi)有特殊說(shuō)明,細(xì)胞一般是一傳二。

 

凍存方法        70%*培養(yǎng)基,20%FBS,10%DMSO,先用現(xiàn)配。

儲(chǔ)存:液氮中長(zhǎng)期保存。

 

     1觀察細(xì)胞最好在低倍鏡下觀察,便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

         2在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落,可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

          3收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等,請(qǐng)于一周內(nèi)與我們聯(lián)系。

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